看似簡單的老化,卻隱藏著不容我們忽視的細節(jié):
什么時候需要老化色譜柱?
色譜柱的耐受溫度是多少?
怎么判斷色譜柱的老化是否完成?
色譜柱為什么需要老化?
色譜柱老化主要是為了除去一些可能存在的污染物,或者吸附的一些揮發(fā)性有機物,這些非目標物的存在,都會干擾我們的色譜柱正常出峰,并影響分離性能,老化色譜柱,就是為我們即將進行的分離實驗做好準備。
什么時候需要老化色譜柱?
一般以下3種情況需要老化色譜柱,一是拿到新柱子時,二是使用一段時間后,發(fā)現色譜柱的性能有所下降或者有流失干擾時,三是長時間未用再次使用時;
色譜柱的耐受溫度究竟是多少?
在拿到一根色譜柱時,我們首先要關注的就是它的耐溫范圍,通常情況下,廠家都會在COA和色譜柱的銘牌上標注這根色譜柱的使用溫度范圍,以CD-1為例,耐溫范圍為-60℃ -325℃/350℃ ,耐受低溫是-60℃,但有2個高溫上限,其中較低的溫度上限為恒溫溫度上限,即色譜柱可以在該溫度下長時間使用,如可避免,也請盡量低于該溫度,較高的溫度上限代表的是程序升溫的的溫度上限,表示色譜柱升到這個溫度后只能做短暫停留(一般不超過15min ),但是一定不能超過這個溫度上限,否則會嚴重破壞固定液,造成不可修復的損傷。一般來說,如果低溫段就可以滿足實驗的分析需求,就沒必要把溫度設的太高,因為溫度越高,對固定液的壽命影響就越大,不利于色譜柱的長期使用。
老化的具體方法是什么?
氣相柱可以分為毛細管柱和填充柱,一般在購買我們生產的填充柱時,我們都會附上填充柱的老化方法,在這里我就不贅述了。毛細管柱根據目標物的分配原理不同,又可以分為多孔層開管毛細管柱(就是我們常說的PLOT柱)和涂壁開管毛細管柱(WCOT ),因為這兩者在固定相方面存在差異,所以老化的方法也是不一樣的。
由于大多數plot柱都是由粘合在一起的多孔顆粒組成的,所以不宜耐受較強的氣流沖擊,所以在老化時,一定要慢慢的提升柱頭壓,直至升至合適的流速。升溫速率也建議采用較緩的速率,一般5℃/min,老化時間也會比WCOT長,老化的最高溫度和老化時間需要參照廣家的建議。由于Plot柱的吸附性能非常強,所以一定要注意載氣的純度,建議使用脫水和脫經的載氣,以防載氣中的極性物質被吸附。
WCOT柱是目前應用的比較廣泛的柱子,比如我們常說的CD-5 , CD-WAX均是這一類的毛細柱。這類柱子老化的一般步驟是∶安裝好色譜柱后,先開通載氣5-10min,以盡可能的吹走色譜柱內可能殘余的氧氣,然后打開柱溫箱,一般從40度緩慢升至方法溫度上限+30度左右,或者色譜柱的最高使用溫度以下20-30度,然后繼續(xù)老化2個小時左右,整個過程中必須保持載氣通暢。一般升溫速率建議5-10℃ /min,對于強極性色譜柱,比如CD-WAX,建議采用較緩的升溫速率5℃ / min。
怎么判斷色譜柱已經老化完全?
對于毛細柱而言,一般在老化完成后,按照我們即將使用的升溫程序,走1-2張不進樣的譜圖,然后將譜圖疊加起來,如果譜圖基本吻合,我們就可以判斷,老化基本已經完成。
在這里需要注意的是,如果您在老化完成后,發(fā)現譜圖在低溫段基線偏高,或有鬼峰出現,這并不是真正的柱流失,而是系統(tǒng)內有些部件可能被污染了,因為色譜柱的流失基本上一般只會出現在高溫段。